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超低分子量蛋白Marker(3.3~20.1kDa)图片
产品货号:
QN2665
中文名称:
超低分子量蛋白Marker(3.3~20.1kDa)
英文名称:
Protein Marker(3.3kD-20.1kD)
产品规格:
15T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.3kD~20.1kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种蛋白含量约为15~22.5μg,配有一支1×上样缓冲液。
超低分子量蛋白Marker(3.3~20.1kDa)


组分规格
超低分子量蛋白Marker(3.3~20.1kDa)15T
1×Loading buffer150μL

保存:-20℃,有效期1年。


  • 开封后,溶于150μL 1×Loading buffer,沸水浴5分钟,可根据需要进行小量分装,每管10μL,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
  • 使用前取分装后的小管室温融化后,沸水浴5分钟即可上样电泳,用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带。



附I:凝胶的配置方法
分离胶夹层胶浓缩胶
20%/4.5mL16.5%/4.5mL15.5%/4.5mL10%/2mL4%/2mL
49.5%T 3%C///0.407mL0.160mL
49.5%T 6%C1.82mL1.50mL1.395mL//
凝胶缓冲液1.50mL1.50mL1.50mL0.667mL0.496mL
甘油0.48mL0.48mL0.48mL//
ddH2O0.70mL1.02mL1.125mL0.926mL1.344mL
10%APS40μL40μL40μL20μL20μL
TEMED5μL5μL5μL3μL3μL


附II:凝胶制备及染色注意事项
  • 先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,最后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30v跑1~2小时后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100v,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6~8小时。
  • 由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
  • 由于SDS-PAGE的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000,因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。
  • 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
  • 电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:QN1106,该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。


附III:小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制
  • 49.5%T 3%C (配制夹层胶和浓缩胶)
    丙烯酰胺48g
    甲叉双丙烯酰胺1.5g
    用ddH20溶解后定容至100mL
  • 49.5%T 6%C (配制分离胶)
    丙烯酰胺46.5g
    甲叉双丙烯酰胺3.0g
    用ddH20溶解后定容至100mL
  • 凝胶缓冲液
    Tris碱182g
    ddH20 300mL
    用HCl调节pH值至8.45
    用ddH20定容至500mL
    再加入SDS 1.5g
  • 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕
    Tris碱121.1g
    ddH20 400mL
    用HCl调pH值至8.9
    用ddH20定容至500mL
  • 阴极缓冲液(上槽缓冲液)
    Tris碱12.11g
    Tricine 17.92g
    SDS 1g
    用ddH20定容至1000mL
    此溶液不用调节pH值
  • 固定液
    0.5%戊二醛
    30%乙醇
    用ddH20定容至100mL
  • 染色液
    50%甲醇
    10%乙酸
    0.2%考马斯亮蓝G-250
    用ddH20定容至500mL

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